分光光度法是指應(yīng)用分光光度計(jì)的分析方法，因其具有靈敏、準(zhǔn)確、快速及選擇性好等特點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室的元素分析，分光光度計(jì)的使用雖然簡(jiǎn)單，但是其原理及一些基礎(chǔ)知識(shí)想必有許多小伙伴也是不了解的，今天分享給大家，希望能對(duì)你有所幫助。

分光光度計(jì)分類：

1.可見(jiàn)光分光光度計(jì)：測(cè)定波長(zhǎng)范圍為400～760nm的可見(jiàn)光區(qū)；

2.紫外分光光度計(jì)：測(cè)定波長(zhǎng)范圍為200～400nm的紫外光區(qū)；

3.紅外分光光度計(jì)：測(cè)定波長(zhǎng)范圍為大于760nm的紅外光區(qū)；

4.熒光分光光度計(jì)：用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜；

5.原子吸收分光光度計(jì)：光源發(fā)出被測(cè)的特征光譜輻射，被經(jīng)過(guò)原子化器后的樣品蒸氣中的待測(cè)元素基態(tài)原子所吸收，通過(guò)測(cè)定特征輻射被吸收的大小，來(lái)求出被測(cè)元素的含量。

分光光度計(jì)使用方法與步驟：

1.預(yù)熱儀器。為使測(cè)定穩(wěn)定，將電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)，使分光光度計(jì)預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時(shí)和在不測(cè)定時(shí)應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開(kāi)，使光路切斷。

2.選定波長(zhǎng)。根據(jù)要求，轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長(zhǎng)。

3.固定靈敏度檔。根據(jù)有色溶液對(duì)光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2-0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動(dòng)靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不再變動(dòng)。一般測(cè)量固定在“1”檔。

4.調(diào)節(jié)“0”點(diǎn)。輕輕旋動(dòng)調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時(shí)，比色皿暗箱蓋是打開(kāi)的，光路被切斷，光電管不受光照)。

5.調(diào)節(jié)T=100%。將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的*格內(nèi)，有色溶液放在其它格內(nèi)，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動(dòng)光量調(diào)節(jié)器，使透光度T=100%，即表頭指針恰好指在T=100%處。

6.測(cè)定。輕輕拉動(dòng)比分光光度計(jì)色皿座架拉桿，使有色溶液進(jìn)入光路，此時(shí)表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華。讀數(shù)后，打開(kāi)比色皿暗箱蓋。

7.關(guān)機(jī)。實(shí)驗(yàn)完畢，切斷分光光度計(jì)電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。